A técnica central na tecnologia do DNA recombinante é o isolamento de moléculas de DNA e sua inserção no DNA de outro organismo. Para isso é preciso isolar o trecho de DNA a ser inserido. Esse processo envolve a fragmentação do DNA dos cromossomos na interfase , o que é feito pela ação de enzimas especiais denominadas enzimas de restrição. A descoberta dessas enzimas permitiu grandes avanços na manipulação do DNA. Nas bactérias , essas enzimas fazem parte dos mecanismos de defesa desses procariontes contra os vírus, pois atuam como verdadeiras "tesouras moleculares", cortando o DNA viral em vários pedações e tornando-o inativo. Hoje há inúmeras dessas enzimas de restrição identificadas , as quais são isoladas das bactérias e purificadas. Essas enzimas são comercializadas por grandes empresas da área de Biologia molecular vendidas e especialistas que trabalham nessa área. Cada enzima de restrição corta o DNA somente quando encontra uma sequência específica de bases nitrogenadas . Dessa forma , esse corte não é feito em qualquer lugar. Os cientistas já sabem onde atua cada uma das enzimas de restrição conhecidas. Por exemplo, existe uma enzima chamada Eco R1 , que corta o DNA toda vez que encontra a seguinte sequência : --- GAATTC - CTTAAG . Ao encontrar essa sequência , a Eco R1 sempre corta o DNA entre as bases G e A. Além dessas enzimas com capacidade de cortar o DNA em locais específicos , os cientistas têm conseguido inserir segmentos isolados em outra molécula de DNA , com o uso de enzimas chamadas DNA ligases. Aproveitando-se dessas propriedades , os cientistas têm usado as enzimas de restrição para cortar moléculas de DNA de vários organismos, inclusive das próprias bactérias . Assim, tem-se conseguido trabalhar com trechos menores da molécula de DNA e isolar genes. Esses genes ou trechos de DNA isolados são unidos a moléculas de moléculas de DNA de outro organismo. A molécula de DNA associada ao novo trecho inserido é denominada DNA recombinante.
